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談談鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的使用方法

 更新時間:2022-10-10    點擊量:566
  鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體利用雜交瘤技術制備,將具有此特性的單個雜交瘤細胞培養(yǎng)成細胞群,從根本上解決了抗體制備中長期存在的特異性和重復性問題,可直接用于疾病診斷、預防、治療和免疫機制研究。
 
  鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的使用方法:
 
  1、首先將試劑盒恢復至室溫(約30分鐘),然后用純水配制清洗液至工作濃度(一份濃縮清洗液加19份純水)。
 
  2、取出酶標簽板。每個試樣需要6個孔,陽性對照為6個孔。將多余的儲存在自封袋中,并記住添加干燥劑。
 
  3、細胞培養(yǎng)上清液50μL加入酶標微孔板,每個樣品6個孔,每個陽性對照品50個孔然后再添加50μL每孔樣品稀釋劑。貼上封板膜,在37℃孵育30分鐘。
 
  4、丟棄紙板中的液體,拍干紙板,或在經(jīng)過五次洗滌后仍無法去除纖維的吸水材料上機洗五次。然后將六種酶標記的二級抗體中的每一種添加到每個樣品的六個微孔中,μl。對于一般陽性對照的六個孔,情況也是一樣的。在加樣圖或酶標板上標記。貼上封板膜,在37℃孵育30分鐘。
 
  5、吸收并丟棄板中的液體。將紙板清洗5次后,將其拍干或在不去除纖維的吸水材料上機洗5次。在每個孔中分別加入50份顯影劑A和50份顯影劑B,μl。更換一層新的密封膜,然后在37℃下貼板顯影20分鐘。
 
  6、該試劑盒的特異性好。通常,可以用肉眼觀察結(jié)果,通過觀察與藍孔對應的酶標記的二級抗體,可以知道該樣本的Ig類或亞類。反應終止溶液反應終止后,使用微孔板分析儀測量450nm處的波長和630nm處的參考波長,以獲得雙波長測量結(jié)果。參考高值孔對應酶標簽的二級抗體,了解該樣本的Ig類或亞類。陽性對照0D小于0.5。實驗無效,需要重新進行。
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